PCR 仪(Veriti 96-Well)使用说明
操作步骤:
1. 打开 PCR 仪的热盖,插入 0.2 ml 的样品管,盖好热盖。打开 PCR 仪的电源,仪器程序 开始初始化,需等待几分钟。初始化完成后,显示主菜单,点“Browse/New Methods” , 进入 PCR 程序列表。
2. 可以直接点一个 PCR 程序,选择“Start Run”运行;点右边的符号,可以选择不同的文 件夹。如要新建一个 PCR 程序,点“New” ,出现 PCR 程序。
3. 添加一段程序:点中上方的“Stage”位置,该位置变红;再点“Add” ,软件将加入一 段新的程序。修改循环数、温度、时间:点中循环次数、温度或时间位置,下方出现数 字键。依次点数字键,出现合适数字后,点“Done”确定。
4. 增加一个步骤:点“Step”位置,该位置变红;再点“Add” ,软件将加入一个新的步骤; 删除一个步骤:点“Step”位置,在点“Delete” ,软件将该步骤删除。
5. 建立梯度模式: 点中一个步骤, “Option” 在出现的选项中, “VeriFlex step” 再点 键, 点 , 出现梯度创建窗口:输入 6 个梯度温度,温度下方的“1-2”是指对应的 1、2 两行加 热孔, 全部输好后, “Done” 点 确定。 注意: 相邻的两个梯度温度之差大不能*过 5℃ !
6. 建立渐变模式: 点中一个步骤,再点“Option”键,在出现的选项中,点“Auto Delta” , 出现渐变模式创建窗口。点“Staring Cycle” ,输入起始循环数;点“Delta Temperature” , 输入温度变化值;点“Delta Time” ,输入时间变化值。
7. 增加暂停步骤:点中一个步骤,再点“Option”键,在出现的选项中,点“Pause” ,输 入暂停的起始位置,暂停间隔和暂停时间,点“Done”确定。
8. 编辑 PCR 程序完成后,点“Save”保存。点“Run Method” ,输入 PCR 程序名称,选择 保存 PCR 程序的文件夹, 再输入反应体积和热盖温度 (这两项在运行程序时可以修改) , 点“Saveδ Exit”确定。
9. 回到 PCR 程序列表界面,选择新建的 PCR 程序。点“Start Run” ,出现运行参数设置窗 口输入反应体积和热盖温度,点“Start Run Now”开始运行 PCR 程序。
10.仪器运行选中的 PCR 程序,显示运行监视窗口。
11. 暂停运行: 点“Pause Run” ,仪器暂停,出现暂停选项栏“Remaining Time”显示 暂停剩余时间, “Elapse Time”显示已暂停时间。如果需要修改暂停时间,输入时间值, 点“Done”确定;点“Resume Run” ,结束暂停,继续运行 PCR 程序。
12.终止运行:点“Stop”可以终止整个 PCR 程序。
13.反应报告: PCR 程序结束后,仪器会自动生成反应报告,显示当次反应的各项指数。 该报告可以保存和打印。
14.PCR 反应结束后,打开热盖,取出样品,关闭仪器电源。并开盖放置,使热盖和加热 模块正常降温。
仪器名称 | Veriti 96孔多重控温梯度PCR仪 | |
厂家 | 美国Applied Biosystems公司 | |
主要规格及技术指标 | 1. 温度范围:4.0℃-99.9℃; 2. 温度显示:显示经计算机计算的样品实际温度,到0.1℃; 3. 升降温速度:升降温速度=3.9℃/秒,样品实际平均温度变化速度3.35℃/秒; 4. 6个温控模块用于PCR优化,区域间温度差异大可以达到5℃,整板温差可以达到25℃; 5. 温度均一性:<±0.5℃(20秒后到达95℃); 6. 温度性:±0.25℃(35-99.9℃);高灵敏度低温EMCCD,制冷温度低于-25℃; | |
主要功能及应用范围 | 用于聚合酶链式反应 (Polymerase Chain Reaction, PCR),扩增特定的DNA片段。
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