如何检测食品中农药残留量,上海九游AG国际贸易有限公司为大家介绍的食品中农药残留量检测的方法是酶抑制率法,或叫做分光光度法。
原理
在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物与显色剂反应,产生黄色物质,用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值,计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
试剂
pH8.0缓冲溶液:分别取11.9g无水磷酸氢二钾与3.2g磷酸二氢钾,用1000mL蒸馏水溶解。
显色剂:分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)和15.6mg碳酸氢钠,用20mL缓冲溶液溶解,4℃冰箱中保存。
底物:取25.0mg硫代乙酰胆碱,加3.0mL蒸馏水溶解,摇匀后置4℃冰箱中保存备用。保存期不*过两周。
乙酰胆碱酯酶:根据酶的活性情况,用缓冲溶液溶解,3 min的吸光度变化值应控制在0.3以上。摇匀后置4℃冰箱中保存备用,保存期不*过四天。
可选用由以上试剂制备的试剂盒。乙酰胆碱酯酶的值应控制在0.3以上。
仪器
分光光度计或相应测定仪(上海九游AG国际农药残留检测仪)。
常量天平。
恒温水浴或恒温箱。
操作步骤
样品处理:选取有代表性的蔬菜样品,冲洗掉表面泥土,剪成1cm左右见方碎片,取样品1g,放入烧杯或提取瓶中,加入5mL缓冲溶液,振荡1 min ~2min,倒出提取液,静置3 min ~5min,待用。
对照溶液测试:先于试管中加入2.5mL缓冲溶液,再加入0.lmL酶液、0.1mL显色剂,摇匀后于37℃放置15min以上(每批样品的控制时间应一致)。加入0.lmL底物摇匀,此时检液开始显色反应,应立即放入仪器比色池中,记录反应3 min的吸光度变化值。
样品溶液测试:先于试管中加入2.5mL样品提取液,其它操作与对照溶液测试相同,记录反应3min的吸光度变化值。
结果判定
结果以酶被抑制的程度(抑制率)表示。
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时,表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在,样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2次以上。
对阳性结果的样品,可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。
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